Сертификация спирта в России в Санкт-Петербурге

4 технические требования

4.1 Характеристики

4.1.1 Этиловый ректификованный спирт должен быть выработан в соответствии с требованиями настоящего стандарта по технологическому регламенту и технологическим инструкциям, утвержденными для спирта конкретного наименования в установленном порядке.

4.1.2 По органолептическим показателям этиловый ректификованный спирт должен соответствовать требованиям, указанным в таблице 1.Таблица 1

4.1.3 По физико-химическим показателям этиловый ректификованный спирт должен соответствовать требованиям, указанным в таблице 2.Таблица 2

(Измененная редакция, Изм. N 1).

4.1.4 Наличие фурфурола в спирте не допускается.

4.2 Требования к сырью и материалам

4.2.1 Спирты “Люкс”, “Экстра” и “Базис” вырабатывают из различных видов зерна и смеси зерна и картофеля (количество крахмала картофеля в смеси не должно превышать 35% при выработке спирта “Люкс” и 60% – при выработке спирта “Экстра” и “Базис”).Спирт “Альфа” вырабатывают из пшеницы, ржи или из смеси пшеницы и ржи. Допускается устанавливать требования к соотношению состава сырья при выработке спирта для экспорта условиями контракта.

4.2.2 Спирты высшей очистки и 1-го сорта в зависимости от исходного сырья вырабатывают:- из зерна, картофеля или из смеси зерна и картофеля;- из смеси зерна, картофеля, сахарной свеклы и мелассы, сахара-сырца и другого сахаро- и крахмалосодержащего сырья в различных соотношениях;- из мелассы;- из головной фракции этилового спирта, полученной при выработке спирта из пищевого сырья [1]. Примечание – Этиловый ректификованный спирт, вырабатываемый из головной фракции этилового спирта, для производства водок и ликероводочных изделий не используется.При производстве этилового ректификованного спирта применяют вспомогательные материалы, разрешенные к применению в спиртовой промышленности Минздравом России. (Измененная редакция, Изм. N 1).

4.3 Упаковка

4.3.1 Этиловый ректификованный спирт разливают в специально оборудованные и предназначенные для него цистерны или резервуары, изготовленные из материалов, разрешенных Минздравом России для контакта с продуктом данного вида.

4.3.2 Цистерны и резервуары должны герметически закрываться крышками, иметь воздушники, оборудованные предохранительными клапанами. Для установления уровня спирта применяют поплавковые или другие безопасные указатели уровня.

4.3.3 Цистерны и резервуары со спиртом, расположенные вне помещений, должны быть опломбированы.

4.3.4 Допускается разливать спирт в чистые бочки по ГОСТ 13950 или по ГОСТ 6247, бутыли по ГОСТ Р 51477, канистры по ГОСТ 5105 и другие емкости, изготовленные из материалов, разрешенных Минздравом России для контакта с продуктом данного вида, которые должны быть опечатаны или опломбированы.

Упаковка и укупорка тары с этиловым ректификованным спиртом должны обеспечивать его сохранность и соответствовать требованиям ГОСТ 26319.(Измененная редакция, Изм. N 1).

4.3.5 Упаковывание спирта при поставках в районы Крайнего Севера и труднодоступные районы должно производиться в соответствии с требованиями ГОСТ 15846.

4.4 Маркировка

4.4.1 Транспортная маркировка – по ГОСТ 14192. Маркировка, характеризующая транспортную опасность груза, – по ГОСТ 19433 с указанием следующей информации:- наименование предприятия-изготовителя, его адрес;- наименование продукции;- объем, дал;- масса брутто, кг;- номер бочки, бутыли, канистры и партии;- надпись “легковоспламеняющаяся жидкость”;- знак опасности (черт. 3); классификационный шифр 3212;

7 методы анализа

7.1 Отбор проб – по ГОСТ 2517.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

 7.2 Общие указания

Результаты анализа должны быть записаны с той же степенью точности, с которой установлена по показателю норма.

Допускается применять другие средства измерений с метрологическими характеристиками и оборудование с техническими характеристиками не хуже, а также реактивы по качеству не ниже, чем в предусмотренных настоящим стандартом методах анализа.

 7.3 Определение внешнего вида и запаха

Сущность метода заключается в оценке цвета, прозрачности и запаха спирта, выполняемой органолептически. Органолептическую оценку спирта проводят в светлом, хорошо проветриваемом помещении без посторонних запахов.

7.3.1 Определение цвета и прозрачности

Метод основан на визуальном сравнении анализируемого спирта и дистиллированной воды.

 7.3.1.1 Аппаратура, материалы, реактивы, посуда

Штатив для пробирок.

Пробирки 10 или 20 по ГОСТ 19908 из бесцветного стекла. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

7.3.1.2 Проведение анализа

В две одинаковые по размеру пробирки наливают по 10 см3: в одну – анализируемый спирт, в другую – дистиллированную воду.

Сравнивают содержимое пробирок в проходящем рассеянном свете, устанавливают различные отклонения по цвету и определяют наличие механических примесей в анализируемом спирте.

 7.3.2 Определение запаха

Метод основан на органолептической оценке запаха анализируемого спирта.

7.3.2.1 Аппаратура, материалы, реактивы, посуда

Термометры жидкостные стеклянные с ценой деления 0,1°С или 0,5°С по ГОСТ 28498.

Цилиндры 2-50-2 по ГОСТ 1770.

Бокалы дегустационные.

Склянка с пришлифованной пробкой.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

7.3.2.2 Проведение анализа

Анализируемый спирт разбавляют дистиллированной водой, получая водно-спиртовой раствор с объемной долей спирта 40% при температуре (20 2)°С. Полученный водно-спиртовый раствор помещают в склянку с пришлифованной пробкой, тщательно перемешивают, наливают в дегустационный бокал и сразу же определяют запах.

Запах анализируемого спирта должен иметь характерный запах ректификованного спирта без запаха посторонних веществ.

 7.4 Определение объемной доли этилового спирта по ГОСТ 3639, раздел 2.

При добавлении к денатурированному и ректификованному синтетическому техническому этиловому спирту изопропилового спирта и метилэтилкетона объемную долю этилового спирта (X_c), %, определяют по разности, вычитая из 100% сумму объемных долей нормируемых примесей и добавляемых компонентов, а также объемную долю воды по формуле (1а) 
X_в – объемная доля воды в анализируемом продукте, %, вычисленная по формуле (1б)X`_в – массовая доля воды, определенная по ГОСТ 14870, раздел 2, %;

p – плотность анализируемого продукта, определенная по ГОСТ 18995.1, г/см3.

Определение изопропилового спирта и метилэтилкетона проводят по аттестованным методикам [21]* и [22]*.________________* Поз. [21], [22] см. раздел Библиография, здесь и далее по тексту. – Примечание изготовителя базы данных.

7.3, 7.4 (Измененная редакция, Изм.N 1, 2).

 7.5 Определение окисляемости – по ГОСТ 32036, 6.6.

 7.6 Определение массовой концентрации кислот в пересчете на уксусную кислоту – по ГОСТ 32036, 6.9.

7.5, 7.6 (Измененная редакция, Изм. N 2).

 7.7 Определение массовой концентрации уксусного альдегида, этилового эфира уксусной кислоты, спиртов C3 C4 (пропанола-1, пропанола-2, бутанола-1, бутанола-2, изобутанола), кротонового альдегида, объемной доли метилового спиртаОпределение проводят методом газовой хроматографии на хроматографе, оснащенном капиллярной колонкой с применением абсолютной градуировки.

 7.7.1 Аппаратура, материалы, реактивы, посуда

Газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором с уровнем флуктуации шумов нулевого сигнала не более 2·10-12 А, с дрейфом нулевого сигнала детектора не более 2·10-12 А/ч, с пределом детектирования 2·10-12 гС/с.

Колонка газохроматографическая капиллярная HP-FFAP (США) 50 м х 0,32 мм х 0,52 мкм или колонка газохроматографическая капиллярная ВИТОКАП 50 м х 0,5 мм х 0,52 мкм.

Микрошприц вместимостью 10 мм3 фирмы Hewlett Packard, Agilent Technologies или аналогичный.

Микрошприц вместимостью 100 мм3 фирмы Agilent Technologies или аналогичный.

Компьютер, имеющий программное обеспечение, позволяющий производить обработку хроматограмм.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный [6].

Весы неавтоматического действия, обеспечивающие для навесок массой от 0,05 до 200 г относительную погрешность измерения не более ±1%.

Газ-носитель: азот по ГОСТ 9293, особой чистоты или 1-го сорта повышенной чистоты или гелий газообразный очищенный марки А или Б по [7]. Допускается использовать генераторы азота.

Водород технический по ГОСТ 3022 марки А или водород от генератора водорода.

Воздух сжатый в баллоне. Допускается использовать компрессоры любого типа, обеспечивающие необходимое давление и чистоту воздуха согласно инструкции по эксплуатации газового хроматографа.

Спирт этиловый синтетический ректификованный с объемной долей основного вещества не менее 96,2%.

Альдегид уксусный технический по [8].

Эфир этиловый уксусной кислоты по [9].

Пропанол-1 для хроматографии, х. ч., по [10].

Пропанол-2 для хроматографии, х. ч., по [11].

Бутанол-1 для хроматографии, х. ч., по [12].

Бутанол-2 для хроматографии, х. ч., по [13].

Спирт изобутиловый по ГОСТ 6016, ч. д. а., или спирт изобутиловый (изобутанол) для хроматографии, х. ч., по [14].

Альдегид кротоновый с массовой долей основного вещества не менее 98%.

Метанол-яд (метиловый спирт) для хроматографии, х. ч., по [15].

Межгосударственный стандартный образец состава растворов токсичных микропримесей в этиловом спирте (комплект РС-1, РС-2, РС-3) по [16].

Аттестованная градуировочная смесь для анализа спирта (комплект ГСПС-1, ГСПС-2, ГСПС-3) по [17].

Государственный стандартный образец состава раствора этанола. Аттестованные смеси для анализа спирта по [18].

Колбы 2-50(100)-2 по ГОСТ 1770.

Пипетки 1-1-2-1 (2, 10, 25) по ГОСТ 29228.

Пипетки 1-2-20 по ГОСТ 29169.

Цилиндр 1-50-2 по ГОСТ 1770.

Склянки для хранения градуировочных смесей с пробками, обеспечивающими герметичность.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).

 7.7.2 Подготовка к анализу

7.7.2.1 Подготовка хроматографа

Капиллярную колонку помещают в термостат хроматограмма* и, не подсоединяя к детектору, продувают газом-носителем при объемном расходе 0,100-0,144 дм3/ч при (160±20)°С не менее 8 ч. Затем колонку присоединяют к детектору и продолжают продувать до установления стабильной нулевой линии при максимальной температуре термостата, указанной в 7.7.2.3._______________* Текст документа соответствует оригиналу. – Примечание изготовителя базы данных.

Монтаж, наладку и вывод хроматографа на рабочий режим проводят в соответствии с инструкцией, прилагаемой к прибору. 

7.7.2.2 Приготовление градуировочных растворов определяемых веществ

Для приготовления градуировочных растворов готовят сначала три рабочих раствора определяемых веществ в этиловом спирте. Первый раствор должен содержать только уксусный альдегид (раствор А). Второй – этиловый эфир уксусной кислоты, пропанол-1, пропанол-2, бутанол-1, бутанол-2, изобутанол, кротоновый альдегид, метиловый спирт (раствор В).

Результат вычислений массовой концентрации i-х компонентов в рабочих и градуировочных растворах записывают с точностью до первого десятичного знака.

Приготовление градуировочных растворов проводят в вытяжном шкафу при температуре окружающего воздуха 18°С-22°С. Градуировочные растворы хранят в холодильнике в герметически закрытой посуде. Срок хранения – 1 мес.

7.7.2.2.1 Приготовление рабочих растворов

 а) Приготовление рабочего раствора А

В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 50 см3 этилового спирта и вносят пипеткой, охлажденной в морозильной камере, 0,1 см3 уксусного альдегида. Содержимое колбы перемешивают взбалтыванием, доводят объем раствора в колбе этиловым спиртом до уровня на 1 см ниже метки и выдерживают при температуре 20 °С в течение 25 мин.

 б) Приготовление рабочего раствора В

В мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают 25 см3 этилового спирта, взвешивают, затем последовательно вносят микрошприцем вместимостью 100 мм3 по 50 мм3 каждого определяемого вещества, метилового спирта – 250 мм3.

После внесения каждого компонента колбу взвешивают. Содержимое колбы перемешивают взбалтыванием, доводят объем раствора в колбе этиловым спиртом до уровня на 1 см3 ниже метки и выдерживают при температуре 20°С в течение 25 мин. Затем доводят объем раствора в колбе до метки этиловым спиртом и тщательно перемешивают.

Результаты всех взвешиваний в граммах записывают с точностью до четвертого десятичного знака.

Массовую концентрацию i-го компонента (Ci), мг/дм3, вычисляют по формуле (1)*

______________________* Формула (2). (Исключена, Изм. N 1).

где mi – масса навески определяемого вещества, г;

50 – вместимость мерной колбы, см³.

(Измененная редакция, Изм. N 1). 

7.7.2.2.2 Приготовление градуировочных растворов

Растворы готовят объемным методом путем последовательного разбавления. Готовят пять градуировочных растворов.

 а) Приготовление градуировочного раствора N 1

В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 50 см3 этилового спирта. Далее в колбу вносят пипеткой вместимостью 2 см3 по 2,0 см3 каждого из двух рабочих растворов А и В. Объем раствора в колбе доводят до метки этиловым спиртом и тщательно перемешивают.

Массовую концентрацию каждого определяемого компонента (Ciгр), мг/дм3, вычисляют по формуле (3)**

______________________** Формула (4). (Исключена. Изм. N 1 ). 

где V- объем рабочего раствора А или В, взятого для приготовления градуировочного раствора, см3;

Ci – массовая концентрация i-го компонента в рабочем растворе, мг/дм3;

100 – вместимость мерной колбы, см3.

 б) Приготовление градуировочного раствора N 2

В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 50 см3 этилового спирта. Далее в колбу вносят пипеткой вместимостью 1 см3 по 1,0 см3 каждого из двух рабочих растворов А и В. Объем раствора в колбе доводят до метки этиловым спиртом и тщательно перемешивают.

Массовую концентрацию каждого определяемого компонента (Ciгр), мг/дм3, вычисляют по формуле (3)

 где V- объем рабочего раствора А или В, взятого для приготовления градуировочного раствора, см3.

 в) (Исключен, Изм. N 1).

 г) Приготовление градуировочного раствора N 4

В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 50 см3 этилового спирта. Далее в колбу вносят пипетками вместимостью 10 и 20 см3 соответственно 10,0 см3 градуировочного раствора N 1. Объем раствора в колбе доводят этиловым спиртом до метки и тщательно перемешивают.

Массовую концентрацию каждого определяемого компонента (Ciгр), мг/дм3, вычисляют по формуле (3)

 где V- объем градуировочного раствора N 1, см3;

Ci  – массовая концентрация i-го компонента в градуировочном растворе N 1, мг/дм3.

 д) Приготовление градуировочного раствора N 5

В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 50 см3 этилового спирта. Далее в колбу вносят пипетками вместимостью 10 см3 по 10,0 см3 градуировочного раствора N 2. Объем раствора в колбе доводят этиловым спиртом до метки и тщательно перемешивают.

Массовую концентрацию каждого определяемого компонента  (Ciгр), мг/дм3, вычисляют по формуле (3)

 где V- объем градуировочного раствора N 2, см3;

Ci  – массовая концентрация i-го компонента в градуировочном растворе N 2, мг/дм3.

7.7.2.3 Условия хроматографического анализа 

Измерения выполняют при следующих условиях:

Допускается проведение анализа в других условиях хроматографирования, обеспечивающих аналогичное разделение компонентов.

При проведении анализа необходимо проводить контроль и оценку степени разделения пиков определяемых веществ. Рассчитывают коэффициент разделения.

Коэффициент разделения пиков определяемых веществ (R) вычисляют по формуле (5) L– расстояние между вершинами пиков на хроматограмме, ед. времени;

l1, l2 – ширина основания соседних пиков, ед. времени.

Хроматограммы пригодны для дальнейшей обработки, если 
Если условия разделения не выполняются, рекомендуется провести корректировку коэффициента деления потока в сторону уменьшения количества пробы, вводимой в колонку.

7.7.2.4 Построение градуировочной характеристики

До построения градуировочной характеристики проводят анализ этилового спирта, применяемого для приготовления градуировочных растворов, для учета количества примесей, вносимых со спиртом в градуировочные растворы при их приготовлении. Этиловый спирт (растворитель) хроматографируют три раза при условиях, указанных в 7.7.2.3.

Если при анализе детектируются пики определяемых примесей, при этом отношение сигнал (высота пика): шум превышает значение 2:1, построение градуировочной характеристики проводят, как указано в 7.7.2.4.2 (по методу стандартных добавок). В противном случае построение градуировочной характеристики проводят по 7.7.2.4.1.

Прибор градуируют по готовым аттестованным градуировочным смесям по [16], или по [17], или по [18] методом абсолютной градуировки.

При отсутствии готовых аттестованных градуировочных смесей определяемых веществ в спирте их готовят из реактивов массовой долей основного вещества не менее указанной для этих веществ в 7.7.1.

(Измененная редакция, Изм.N 1).

7.7.2.4.1 Для построения градуировочной характеристики проводят анализ не менее трех градуировочных растворов с содержанием определяемого вещества, соответствующим началу, середине и концу диапазона измеряемых концентраций.

Записывают хроматограммы анализа каждого градуировочного раствора, регистрируют время удерживания и площади пиков определяемых веществ. Порядок выхода пиков с использованием капиллярной колонки HP-FFAP представлен на рисунке 1. Порядок выхода пиков с использованием капиллярной колонки ВИТОКАП аналогичен.

1 – уксусный альдегид; 2 – этиловый эфир уксусной кислоты; 3 – метиловый спирт; 4 – пропанол-2; 5 – этиловый спирт; 6 – бутанол-2; 7 – пропанол-1; 8 – кротоновый альдегид; 9 – изобутанол; 10 – бутанол-1

Рисунок 1 – Типовая хроматограмма градуировочного раствора

Каждый градуировочный раствор хроматографируют три раза при условиях, указанных в 7.7.2.3, усредняя полученные значения площадей пиков и контролируя сходимость результатов измерения d по формуле (14).

Процедуру градуировки повторяют для каждого градуировочного раствора.

Градуировку хроматографа выполняют один раз в 3 мес в том случае, если за этот период не проводились никакие мероприятия, вызывающие ее изменения.

Рассчитывают коэффициенты a и b градуировочного уравнения (6)

 где yi- значение площади пика, усл. ед.;ci – массовая концентрация определяемого вещества, мг/дм.

Расчет коэффициентов a и b осуществляют методом наименьших квадратов по алгоритму, заложенному в компьютерной программе хроматографа, или вычисляют по формулам (7),  (8)
где y_j – среднее значение площади пика -го градуировочного раствора, усл. ед.;

cj – массовая концентрация определяемого вещества в -м градуировочном растворе, мг/дм;

n- число градуировочных растворов.

7.7.2.4.2 Построение градуировочной характеристики по методу стандартных добавок

Определение проводят по 7.7.2.4.1.

Рассчитывают коэффициенты a и b градуировочного уравнения (9) 

где (yi-y0) – разница площадей пиков в градуировочном растворе и спирте-растворителе, усл. ед.;

ci – массовая концентрация определяемого вещества (стандартная добавка), мг/дм3.

Расчет коэффициентов  и  осуществляют методом наименьших квадратов по алгоритму, заложенному в компьютерной программе хроматографа, или вычисляют по формулам (10), (11)

где (yj-y0) – разница средних значений площадей пиков определяемого вещества в j-м градуировочном растворе и спирте-растворителе, усл. ед.;(yi-y0)cj – массовая концентрация определяемого вещества (стандартная добавка) в j-м градуировочном растворе, мг/дм3;

n – число градуировочных растворов.

7.7.2.5 Проведение анализа

Анализ пробы спирта выполняют в условиях, приведенных в 7.7.2.3.

Проводят три параллельных определения содержания определяемого вещества в пробе анализируемого спирта.

Определяемые вещества идентифицируют по временам удержания в соответствии с градуировкой.

7.7.2.4.1, 7.7.2.4.2 (Изменненная редакция, Изм.N 1).

7.7.2.6 Обработка результатов

7.7.2.6.1 Обработку результатов измерений проводят с помощью компьютера в соответствии с градуировочными характеристиками.

Массовую концентрацию определяемого вещества (C), мг/дм³, вычисляют по формулам (12)* y– площадь пика определяемого вещества, усл. ед.;

a, b – коэффициенты градуировочного уравнения.

Полученные значения содержания определяемых веществ усредняют и контролируют сходимость результатов измерения.________________* Формула (13). (Исключена, Изм. N 1). 

Контролируемым параметром является относительный размах измеряемых площадей хроматографических пиков или относительный размах концентраций определяемых веществ. Результат контроля признается положительным при выполнении условия (для P=0,95) (14)

 где ymax – максимальная площадь хроматографического пика или максимальная концентрация определяемого вещества, усл. ед.;

ymin – минимальная площадь хроматографического пика или минимальная концентрация определяемого вещества, усл. ед.;

d – норматив контроля сходимости, %, (таблица 3). 

7.7.2.6.2 Результаты измерений определяемых веществ выражают следующим образом:

Уксусный альдегид, этиловый эфир уксусной кислоты, пропанол-1, пропанол-2, бутанол-1, бутанол-2, изобутанол, кротоновый альдегид – массовая концентрация в пересчете на безводный спирт (мг/дм3).

Метиловый спирт – объемная доля в пересчете на безводный спирт (%).

Объемную долю метилового спирта (X), %, вычисляют по формуле (15) C– массовая концентрация метилового спирта, мг/дм³;

p – плотность метилового спирта, г/см3.

Для пересчета на безводный спирт результат умножают на коэффициент (П), вычисляемый по формуле (16) P– объемная доля этилового спирта в анализируемой пробе, %;

100 – объемная доля безводного спирта, %.

Массовую концентрацию каждого определяемого вещества (X1), мг/дм3, объемную долю метилового спирта (X3), %, вычисляют по формуле (17) 

где – среднеарифметические значения результатов определения массовой концентрации, мг/дм³, и объемной доли, %, определяемых веществ соответственно; – границы относительной погрешности результата измерения, %, (таблица 2).

Таблица 2

Результаты анализа массовых концентраций спиртов C3 C4 представляют как сумму массовых концентраций пропанола-1, пропанола-2, бутанола-1, бутанола-2, изобутанола, идентифицированных в образце (мг/дм3), в пересчете на безводный спирт.

Считают, что кротоновый альдегид отсутствует в анализируемом спирте, если его пик не детектируется или отношение сигнал (высота пика кротонового альдегида): шум не превышает значение 2:1.

7.7.2.7 Контроль точности результатов измерений

7.7.2.7.1 Контроль правильности построения градуировочной характеристики проводят каждый раз при построении градуировочной зависимости для всех градуировочных растворов.

Результат контроля признается положительным при выполнении условия (18)X_изм – среднее значение массовой концентрации определяемого вещества, мг/дм³, полученное из градуировочной характеристики;

Xj- массовая концентрация определяемого вещества, мг/дм3, в j-м градуировочном растворе;

L- норматив контроля правильности построения градуировочной характеристики, %. 

Значения L в зависимости от диапазона массовой концентрации и массовой доли определяемых веществ приведены в таблице 3.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

7.7.2.7.2 Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль проводят не реже одного раза в месяц. Частоту контроля следует увеличить при большой интенсивности работы прибора.

Контроль проводят по готовым аттестованным градуировочным смесям по [16], или по [17], или по [18], или по свежеприготовленным по 7.7.2.2 градуировочным растворам. Используют два раствора в начале и конце диапазона измерений. Ввод проб в хроматограф осуществляют в соответствии с 7.7.2.3.

Обработку результатов проводят в соответствии с 7.7.2.6.

Результаты контроля считают положительными при выполнении условия (19) X_k  – массовая концентрация определяемого вещества, мг/дм, в контрольном растворе;

Xизм – среднее значение массовой концентрации определяемого вещества, мг/дм, полученное из градуировочной характеристики;

K – норматив контроля стабильности градуировочной характеристики, %.

Значения K в зависимости от диапазона массовой концентрации и массовой доли определяемых веществ приведены в таблице 3. 

7.7.2.7.3 Оперативный контроль погрешности

Контроль погрешности результатов измерений проводят с использованием в качестве образцов для контроля готовых аттестованных смесей по [16], или по [17], или по [18], значения аттестованных концентраций должны находиться в диапазоне массовой концентрации и массовой доли определяемых веществ, указанных в таблице 2.

Норматив контроля погрешности вычисляют по формуле (20) 

где ³, стандартном образце (CO);
X_CO– аттестованное значение массовой концентрации определяемого вещества, мг/дм³, в стандартном образце.Результат контроля погрешности признается удовлетворительным, если выполняется условие (21) ³;
X_CO – аттестованное значение массовой концентрации определяемого вещества, мг/дм³, в аттестованном или стандартном образце для контроля;

N- норматив оперативного контроля погрешности, %.

При превышении норматива оперативного контроля погрешности определение повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

Таблица 3

7.7.2.7.1-7.7.2.7.3 (Измененная редакция, Изм. N 1). 

 7.8 Определение массовой доли битрекса

Определение проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием спектрофотометрического детектора.

 7.8.1 Аппаратура, материалы, реактивы, посуда

Хроматограф изократический “Стайер – UV/VS” со спектрофотометрическим детектором (СФД).

Колонка хроматографическая с внутренним диаметром 4 мм длиной 250 мм.

Фаза неподвижная Диасфер – 110-С-18 зернением 5 мкм или “Phenomenex LUNA C18” зернением 5 мкм.

Комплекс программно-аппаратный “МультиХром” ЗАО “Амперсенд” (г.Москва) либо любое другое аттестованное программное обеспечение, позволяющее проводить градуировку и количественное определение методом абсолютной градуировки.

Весы неавтоматического действия, обеспечивающие для навесок массой от 0,05 до 200 г относительную погрешность измерения не более ±1%.

pH-метр микропроцессорный, модель “pH-410” производства “НПКФ АКВИЛОН” (г. Москва).

Микрошприцы вместимостью 100 мкл фирмы “Rheodyne” серия 1700, модель 810.

Фильтры мембранные с размером пор 0,45 мкм, диаметром 13 мм или 47 мм (каталог фирмы ЗАО “БиоХимМак СТ” (г.Москва). Каталожный номер 7.5 А 045.

Комплект для фильтрации образцов НФ-13 с фильтрами (каталог фирмы ЗАО “БиоХимМак СТ”) (г. Москва).

Комплект для фильтрации и дегазации растворов с насадкой из политетрафторэтилена (ПТФЭ), колбой вместимостью 500 см3 и переходником. Каталожный номер 7.5 А 153 (каталог фирмы ЗАО “БиоХимМак СТ”) (г.Москва).

Ацетонитрил для жидкостной хроматографии ОП-3, ос.ч. [19].

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Битрекс (денатониум бензоат) фирмы Макфарлан Смит Лимитед, или N 30914 (каталог фирмы Sigma-Aldrich 2000 г.), или любой другой фирмы с содержанием основного вещества не менее 99,0%.

Натрий фосфорнокислый однозамещенный 2-водный по ГОСТ 245, х.ч.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч.

Натрия додецилсульфат, х.ч. фирмы AppiChem (Германия), или N 55422 (каталог фирмы Sigma-AIdrich 2000 г.), или любой другой фирмы с содержанием основного вещества не менее 98,0%.

Спирт этиловый ректификованный по действующей нормативной или технической документации с объемной долей не менее 96,2%.

Пипетки 1-2-0,5 по ГОСТ 29169.

Цилиндры 2-100-2, 2-500-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770.

Колбы 2-10-2, 2-50-2, 2-100-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770.

Пипетки 4-2-1-1, 4-2-1-5, 4-2-1-10 по ГОСТ 29227.

Стаканчик СВ-14/8 по ГОСТ 25336.

Флаконы стеклянные для градуировочных и анализируемых растворов вместимостью 1,8 и 5,0 см3 с завинчивающимися крышками и тефлоновыми прокладками фирмы “Supelco”, номера по каталогу 2-6951, 2-7037 и 2-7039.

 7.8.2 Подготовка к анализу

7.8.2.1 Подготовка хроматографа

Хроматограф включают и подготавливают к работе в соответствии с его описанием и руководством по эксплуатации.

7.8.2.2 Подготовка посуды

Стеклянную посуду перед употреблением тщательно моют горячей водой с любым моющим средством, ополаскивают дистиллированной водой и сушат.

7.8.2.3 Приготовление пробы

Объем отобранной пробы, направленной в лабораторию для проведения определений, делят на две части и из каждой части готовят образец.

В стеклянный флакон вместимостью 1,8 см3, предварительно ополоснув его отобранной пробой, пипеткой вместимостью 1 см3 вносят 1 см3 образца.

7.8.2.4 Приготовление подвижной фазы (элюента)

Фосфатный буферный раствор молярной концентрацией c(NaH2PO4·2H2O)=0,1 моль/дм3 готовят следующим образом: растворяют 13,8 г натрия фосфорнокислого однозамещенного 2-водного в 900 см3 воды в мерной колбе вместимостью 1000 см3.

Раствор тщательно перемешивают и доводят до метки водой. Затем 100 см3 полученного буферного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 1000 см3, добавляют воду до метки, одновременно добавляя раствор соляной кислоты молярной концентрации c(НСl)=2 моль/дм3 до pH=3.

Полученный буферный раствор молярной концентрации 0,01 моль/дм3 с pH=3 смешивают с ацетонитрилом в соотношении 40:60 (соответственно), затем добавляют из расчета на 1 дм3 подвижной фазы 7,38 г додецилсульфата натрия. Требуемые объемы ацетонитрила и буферного раствора отмеряют мерными цилиндрами.

Готовый элюент фильтруют через мембранный фильтр и проводят вакуумную дегазацию.

7.8.2.5 Приготовление градуировочных растворов

Приготовление градуировочных растворов проводят при температуре окружающего воздуха 18°С – 22°С.

Точно взвешенного в стаканчике 100 мг битрекса помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, куда предварительно вносят 50 см3 этилового спирта. Раствор перемешивают до полного растворения битрекса и доводят до метки этиловым спиртом (раствор А). Результаты взвешивания в граммах записывают до четвертого десятичного знака.

От полученного раствора отбирают пипеткой 10 см3 и переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят до метки этиловым спиртом (раствор Б). Полученный раствор Б, содержащий 100 мг/дм3 битрекса в этиловом спирте, фильтруют через мембранный фильтр, а затем используют для приготовления градуировочных растворов с массовой концентрацией 0,5; 1,0; 10,0; 50,0 мг/дм3 битрекса в подвижной фазе.

а) Приготовление градуировочного раствора с массовой концентрацией 50 мг/дм3

5,0 см3 раствора Б помещают с помощью пипетки вместимостью 5 см3 в мерную колбу вместимостью 10 см3 и доводят до метки раствором подвижной фазы (элюента).

б) Приготовление градуировочного раствора с массовой концентрацией 10 мг/дм3

1,0 см3 раствора Б помещают с помощью пипетки вместимостью 1 см3 в мерную колбу вместимостью 10 см3 и доводят до метки раствором подвижной фазы.

в) Приготовление градуировочного раствора с массовой концентрацией 1 мг/дм3

1,0 см3 раствора Б помещают с помощью пипетки вместимостью 1 см3 в мерную колбу вместимостью 100 см3 и доводят до метки раствором подвижной фазы.

г) Приготовление градуировочного раствора с массовой концентрацией 0,5 мг/дм3

0,5 см3 раствора Б помещают с помощью микропипетки вместимостью 0,5 см3 в мерную колбу вместимостью 100 см3 и доводят до метки раствором подвижной фазы.

Все полученные растворы после фильтрования помещают в стеклянные флаконы вместимостью 5 см3 с завинчивающимися крышками и тефлоновыми прокладками и хранят в холодильнике. Срок хранения – 6 месяцев.

7.8.2.6 Условия хроматографического анализа:

Режим работы ВЭЖХ со спектрофотометрическим детектором задают либо с клавиатуры хроматографа в соответствии с руководством по эксплуатации, либо с клавиатуры ЭВМ в соответствии с руководством пользователя и контролируют на мониторах в следующем виде:

Для улучшения технических и метрологических характеристик работы хроматографической системы рекомендуется использовать термостат колонок и проводить анализ при температуре 35°С.

Перед началом анализа прокачивают через хроматографическую систему элюент до стабилизации базовой линии детектора в указанном режиме.

7.8.2.7 Градуировка хроматографа

Градуировку хроматографа осуществляют последовательным вводом (в условиях проведения измерения) градуировочных растворов в порядке возрастания их массовых концентраций. Каждый раствор вводят в хроматограф не менее двух раз. Полученные значения площадей пиков усредняют и проверяют приемлемость выходных сигналов хроматографа по 7.8.7.1.

После математической обработки хроматограмм фиксируют параметры удерживания и площади пиков, строят градуировочные характеристики (ГХ), отражающие зависимость среднего значения площади пика от массовой концентрации битрекса в градуировочном растворе.

Градуировочный коэффициент (Ki) вычисляют по формуле (22) 

где Ci – массовая концентрация битрекса в градуировочном растворе, мг/дм3;

За градуировочный коэффициент для определяемого компонента K_i после проверки их приемлемости по 7.8.7.3.
Градуировку хроматографа проводят при внедрении методики, после мероприятий, заведомо приводящих к ее изменению, а также при отрицательных результатах контроля по 7.8.7.4.

 7.8.3 Проведение анализа

Количественный анализ пробы выполняют в условиях, приведенных в 7.8.2.6.

Определяемое вещество идентифицируют по времени удерживания в соответствии с градуировкой.

Проводят два параллельных определения массовой концентрации битрекса.

 7.8.4 Обработка результатов

Массовую концентрацию битрекса в анализируемом продукте (X₄), мг/дм³, вычисляют по формуле (23) 

S – площадь пика битрекса в анализируемом продукте, усл. ед.

За результат анализа принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных определений. Проверку приемлемости результатов параллельных определений проводят по 7.8.7.2.

Массовую долю битрекса (X₅), %, вычисляют по формуле (24) X₄ – массовая концентрация битрекса в растворе, мг/дм³;

p – плотность раствора, определяемая по ГОСТ 18995.1, г/см3;

10000 – коэффициент пересчета.

7.8.5 Характеристики погрешности измерений

Расширенную неопределенность измерений (U), % (при коэффициенте охвата k=2)*, вычисляют по формуле (25) 
* Значение расширенной неопределенности соответствует границе абсолютной погрешности (P=0,95. 

 7.8.6 Оформление результатов измерений

Результаты анализа при записи в документах представляют в следующем виде:

k=2 (26) 

где U – значение расширенной неопределенности измерений (при коэффициенте охвата k=2), приведенное в 7.8.5, %. 

 7.8.7 Контроль точности результатов измерений

7.8.7.1 Проверка приемлемости выходных сигналов хроматографа

Проверяемым параметром является относительный размах выходных сигналов хроматографа, который осуществляется при проведении градуировки, выполнении измерений и контроле стабильности градуировочной характеристики.

Результат проверки признается положительным при выполнении (для P=0,95) условия (27)S_max – максимальная площадь хроматографического пика, усл. ед.;

Smin – минимальная площадь хроматографического пика, усл. ед.;

7.8.7.2 Проверка приемлемости результатов параллельных определений

Результат проверки признается положительным при выполнении (для P=0,95) условия (28) 

где Cmax – максимальное значение массовой доли битрекса, %;

Cmin – минимальное значение массовой доли битрекса, %;

7.8.7.3 Проверка приемлемости градуировочной характеристики

Проверка приемлемости градуировочной характеристики проводится каждый раз при построении градуировочной зависимости для всех градуировочных растворов.

Результат контроля признается положительным при выполнении условия (29)

 где Kimax – максимальное значение градуировочного коэффициента;

Kimin – минимальное значение градуировочного коэффициента;

7.8.7.4 Контроль стабильности градуировочной характеристики

Рекомендуемая периодичность контроля – один раз в месяц. Контроль проводят по свежеприготовленным по 7.8.2.5 градуировочным растворам. Используют по одному раствору в начале и конце диапазона измерений. Ввод проб в хроматограф осуществляется в соответствии с 7.8.2.6, после чего проверяют выполнение условия 7.8.7.3.

Результаты контроля считают положительными при выполнении условия (30)K* – среднее значение градуировочного коэффициента, вычисляемое по 7.8.2.7;

7.9 Допускается определение массовой доли битрекса по ГОСТ 31497 или по [20].

При разногласиях в оценке массовой доли битрекса определение проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии по 7.8.

7.8, 7.9 (Введен дополнительно, Изм. N 1).

Приложение б (справочное). библиография

Приложение Б(справочное)

Приложение Б. (Введено дополнительно, Изм N 1, 2).

официальное изданиеМ.: Стандартинформ, 2021